疫苗類原料藥之製造方法：

應說明原料藥製造及管制的過程，以證明正確的品質管制，及能預防外來因子可能造成的污染。並提供相關的標準操作過程（S-OP）資料。

一 原料藥

（一）應提供用於原料藥製造的材料表單（培養基、緩衝液、多胜合成用之樹脂，化學物質、色層分析用管柱等），材料的測試與產品規格、或相關基準等參考文獻。商品化的材料，應有供應商的產品規格及分析結果（製造標準）證明書。

（二）應說明原料藥純化或製程中使用的單株抗體、酵素及其他蛋白質等試劑、特殊胺基酸及其衍生物、或醣脂等來源，包括供應商之證明書、特異性及來源等資料。應提供細胞生長之原料藥，例如：血清、胰蛋白等外來因子的測試結果。應對各種成分的用途作說明。

1 應表列所有使用於製造原料藥與半製品成份之名稱、測試方法與規格，或其參考文獻。對於商業化之原料藥，應有供應商之分析證明與自家檢定結果。

2 應表列所有使用於製造原料藥與半製品之特殊試劑與材料，如培養基、緩衝液、血清、抗生素、單株抗體、防腐劑。在某些情形，如輔助性之生技產品使用於原料藥之製造過程（例如單株抗體使用於親和性色層分析），應詳述其製備過程及特性。

3 動物性原料藥、試劑及成分的管制：若於製造過程中有使用由動物來源取得之原料藥時，需證明其不含外來物質，如牛海綿狀腦病變 Bovine Spongiform Encephal-opathy（BSE） 物質，與其他動物病毒。

4 申請時應有不含有外來物之確效資料或証明。

二 流程圖：應有一份完整製造過程之流程圖，同時應表列其製程管制與試驗項目。

三 製程：製程中，依其材料來源之不同，應有各相關之資料。

（一）動物來源（包括禽類之受精卵）

用於微生物生長或製造重組蛋白質，及用作疫苗的動物性來源，應視疫苗特性提供（但不限於）下列各項資料：

1 動物的物種與年齡

2 動物的健康狀況，例如：無特定的病原菌

3 外來物質的篩選與檢疫過程

4 動物飼養之控管，例如：適當的動物隔離過程

5 獸醫監督及實驗室監視

6 動物預防接種的說明

7 對採收的組織及採用方法的說明

8 對於牛製品須註明其地區來源及地點

（二）病毒來源

對用於疫苗製造的病毒種源作詳細的說明，提供的資料應包括（但不限於）下列各項：

1 病毒的起源

2 病毒菌株的譜系資料

3 種批系統（Seed Lot System） 的詳細資料

4 維持病毒種源的培養技術

（三）細胞來源

細胞種批系統（Cell Seed Lot System）：應提供有關微生物細胞、動物來源（昆蟲類、人類及其他哺乳類）之細胞或細胞株之細胞受質資料。

1 微生物細胞

（1）應對微生物的物種、菌株、已知的表現型特性及基因型特性作說明。用於疫苗原料藥的微生物細胞及衍生物包括：整個細胞的疫苗（活菌或死菌）、天然的溶菌產物或已純化的免疫原、重組的去氧核醣核酸製品、接合物質及質體去氧核醣核酸疫苗。

（2）應提供製造用各種菌株的歷史及特性鑑定，並對菌株作完整的說明，包括：

A 單離的起源

B 物種

C 生物化學特性（發酵等）

D 菌株鑑別特性鑑定（血清類型等）

E 病毒的感染能力（包括已經執行的減毒方法）

F 已知的基因特性鑑定（標記、插入、剪除等）

G 質體

H 菌株突變的機率（遺傳安定性）

2 動物細胞

（1）應說明對於存於動物起源細胞受質內的外來污染因子所採取的預防、排除或不活化措施。

（2）初代細胞：應提供製造初代細胞的起源組織及用途說明。提供初代細胞株資料，包括（但不限於）下列各項：

A 動物的物種及年齡，及初代細胞的組織來源

B 該初代細胞出處的動物健康狀況，例如：無特定的病原菌

C 用以確保動物適當性的動物飼養方式（隔離過程等）

D 用以確保動物適當性的獸醫及實驗室監視

E 初代細胞受質製備的說明

F 用以證明無外來因子存在的測試及結果

（3）細胞株

製造的受質應包含人類或動物來源的連續細胞株或兩倍體（Diploid） 細胞株。

A 人類細胞受質，應包括使用的材料與方法、起始的組織或器官、種族與地理的起源、年齡、性別及一般生理狀況的說明，如已知捐贈者之疾病史，應提供測試結果。

B 動物細胞受質，應包括物種、體系、起始的組織或器官、地理起源、年齡、性別及一般生理狀況，並可能存於細胞內的外來因子。

3 基因構築體與重組細胞株

對從重組 DNA 製品及使用重組 DNA 的細胞受質，應提供宿主細胞，及重組 DNA 來源及功能的資料，包括：

（1）宿主細胞：應說明宿主細胞的來源、相關的表現型及 基因型、細胞安定性及特性鑑定的結果。

（2）基因構築體（Gene Construct）：應說明引入宿主細胞之基因製備方法，及限制切割圖。並提供完整核酸序列、表現架構之調節因子、轉譯的胺基酸序列，及重要序列特色。

（3）載體：應提供載體的資料，包括載體來源及功能的說明，例如：複製的起源、抗生素耐受性基因、啟動基因及增強基因等。應提供構建載體之限制切割圖部位及特性鑑定之重要基因標記。

（4）最終基因架構：應說明製造最終重組基因架構的過程，包括基因片段、載體、或其他基因的組合過程加以 說明，並提供最終基因架構之限制切割圖。

（5）重組細胞株：應提供將最終基因架構移轉至宿主的方法、移轉的機制、複製的數量及轉移後宿主細胞內（加入體外遺傳因子）的生理狀況等資料。

4 細胞庫系統：應說明細胞庫建立的過程，包括：製備細胞庫的方法、低溫保存方式及細胞庫之管制等資料。應避免微生物污染及防止與其他細胞交互污染。並預防細胞庫儲存環境產生劇烈變化及適當警戒措施，例如：將細胞庫存於不同處的多個冷藏庫內。

（1）種細胞庫（MCB）：應提供種細胞庫內細胞歷史及特性鑑定。

A 對基因重組製品的種細胞庫細胞受質是指從原始單一細胞複製，含有合適基因構築體之感染細胞。B 對非基因重組製品，細胞受質是指來自選定用於製備種細胞庫的母系細胞株。應提供選作種細胞庫的兩倍體細胞株資料。

（2）工作細胞庫（WCB）：應詳述由種細胞庫衍生至工作細胞庫之過程，包括工作細胞庫之鑑別系統、儲存步驟及其細目。對於每一新工作細胞庫，須進行與現有細胞庫各項定性及特性分析之比較。必要時應說明此工作細胞庫之繼代數，以確保其保護性抗原致毒性因子之存在。並應詳述確保培養純度與鑑別之方法與步驟 。

（3）最終產品細胞（End of production cells; EPC）：應說明所使用最終生產細胞之特性，以證明該生產系統之一致性。應包括最終生產細胞表現型與基因型標記之分析結果，以確認其鑑別與純度，並證明其不受外來物質污染。同時應提供該基因構築體之限制酵素分析結果。

（4）細胞庫之特性與試驗：應說明有關庫存細胞之特性與試驗，包括細胞受質之鑑別、純度與適合性試驗之資料及其結果，以確保其可用於製造。若細胞來源為複細胞動物（metazoan cells），應提供對於種細胞庫與工作細胞庫之負荷菌（細菌及真菌）與黴漿菌測試結果，以及可能污染該細胞株之病毒檢測結果。

5 細胞培養與採收

（1）細胞的培養：應對培養過程、生長曲線或生長特性作說明。並提供純度、效價、抗原生產等的管制及測試時間點資料。也應說明對污染管制所採取的措施。

（2）細胞的採收：應說明原料藥由細胞分離所使用的採收方法（沉澱、離心、過濾），並提供採收的標準及產量等資料。對維持採收過程無菌狀態及預防污染所採取的措施加以說明，對生物負荷量試驗監視。如果原料藥在後續處理前需保存，則應說明儲存情況及時間限制。

（四）純化與後續處理

應說明純化過程，並檢附鑑定、純度、濃度及與產品或非產品有關的不純物的分析測試方法。於培養時使用的抗生素及其他成分（例如生長因子、抗體），應於使用前加以排除並確保預防交互污染的過程。

1 執行適當的不活化步驟：應說明

（1）不活化前的純度。

（2）去活化的方法及試劑。

（3）預防凝集及確保不活化劑均質化的方法。

（4）製造過程中實施不活化或滅菌的階段。

（5）監視的參數：對去活化或滅菌方法的適當性說明。

2 純化步驟：

（1）應說明抗原成分純化的目的及原理

A 使用的方法，包括如色層分析用管柱、超速離心機、超速過濾器及單株抗體等試劑或設備。

B 產量。

C 純化過程的測試（例如：ELISA 之敏感度及特異性）。

D 純化過程中無菌狀態或生物負荷量試驗的監視，及預防污染所採取的警戒措施。E 純化用色層分析管柱及吸附劑之再使用及（或）再生。

F 殘餘的不純物及試劑的監視。

（2）流程圖及批次記錄應提供純度、鑑定及生物活性的管制及測試時間點的資料。對純化原料藥之最終認定標準。如果經純化的原料藥在進一步處理前需保存時，應對其儲存情況及時間限制加以說明。

3 安定性試驗：應對純化後中間物質在每個過程（例如：吸收、添加穩定劑、添加防腐劑、低壓冷凍乾燥儲存、乾燥）的安定性的加以說明，並執行監視生物負荷量試驗及所採取預防污染的警戒措施。

4 去毒性：對類毒素或含有類毒素的疫苗，應說明毒素成分的去毒性過程

（1）去毒性所使用的方法及試劑。

（2）實施去毒性的製造過程。

（3）對去毒性使用方法的適當性加以證明。

（五）合成之原料藥：合成原料藥包括線性或複合之合成胜類及經修飾合成或半合成之免疫原（如 lipopeptides 、攜帶蛋白質之胜或攜帶蛋白質結合物之多醣體）。

1 合成胜類：應提供多胜合成及純化過程等的資料。

2 經修飾合成或半合成之免疫原

（1）對原料藥或中間物質經化學或酵素修飾製成，如：將免疫原接合至載體、將毒素以酵素或化學方法減毒及純化。此種修飾作用可能會改變原料藥的免疫抗原性、毒性、安定性、或原料藥之藥動學特性。

（2）製造方法：應說明

A 為確保結合或修飾方法的適當性，應說明原料藥的說明及標準。

B 應說明製造過程及方法、製程管制、產品鑑定及生物活性的測試、以及純化的過程。

（3）產品規格：應檢附每一經修飾原料藥之規格，包含鑑別、純度、效價、物理化學測定及安定性試驗。若該衍生物之檢驗結果將紀錄於藥品最終放行成績書，則每一規格均應提供包含變異性估計值與上下限之確效報告。未反應初始原料藥與製程中試劑之移除步驟須經確效，否則應有其殘餘量規格。

（4）批次記錄：應提供完整（加註簽名蓋章）的代表性批次記錄。