一、特性試驗：須具固有理學之性狀，且無異物及異常氣味。加所附稀釋液溶解後須濃度均一。

二、無菌試驗：不得含有任何可能檢出之活菌。但屬胚胎蛋製造且以非注射方式（Non-Parenteral）免疫者，每劑量所含非病原菌不得超過一個。

三、真空試驗：於暗室距離五毫米以內以Teslar Coil行無極放電時，瓶內須有放電。但填充氮或液態之製劑，不在此限。

四、含濕度試驗：含濕度須為四％以下。但液態之製劑，不在此限。

五、安全試驗：選三至五週齡無特定病原（Specific pathogen free，SPF）雞七隻，隨機取二隻為對照組，其餘五隻依疫苗用法各接種十劑量，接種後觀察三週，觀察期間均須無任何不良反應而健存。

六、病毒含有量試驗：依下列方法擇一試驗，每劑量病毒含有量不可少於其疫苗標示：

（一）供試疫苗以十倍稀釋法稀釋成10（-1 次方）至10（-4 次方）後，以其一毫升腦內注射於一至四日齡SPF雛雞，每稀釋階段至少注射五隻，觀察三週，計算各稀釋階段呈運動失調之雛雞數，並以Reed and Muench法計算病毒含有量。

（二）供試疫苗以十倍稀釋法稀釋成10（-1 次方）至10（-4 次方）後，以其○．一毫升注射於六日齡SPF雞胚胎卵黃囊內，每稀釋階段至少注射五個，注射之雞胚胎經孵化至十八日齡，計算各稀釋階段呈異常之雞胚胎數，並以Reed and Muench法計算病毒含有量。另無接種之同日齡對照雞胚胎七十五％以上須無異常。

七、病毒迷入試驗：以未經稀釋之供試疫苗○．一毫升與等量抗雞腦脊髓炎血清（中和指數二‧五以上之抗體價） 中和後，注射於六日齡SPF雞胚胎卵黃囊內五個以上，經注射之雞胚胎於第十八日齡時檢查均須正常。

八、力價試驗：選三至五週齡SPF雞十二隻，隨機取二隻為對照組，其餘十隻依疫苗之用法用量各接種一劑量，經疫苗免疫後第三至四週採取血清，以雞腦脊髓炎病毒抗原行瓊膠沈澱反應（Agar gel precipitation test），免疫組之血清須八十％以上呈陽性反應。