一、特性試驗：須具固有理學性狀，且無異物及異常氣味。

二、微生物限量試驗：不得含有任何可能檢出之病原細菌（如沙氏桿菌、溶血性大腸桿菌、梭狀芽孢桿菌等），每劑量疫苗中非病原性細菌不得超過十個。

三、病毒迷入試驗：取以磷酸鹽緩衝生理鹽水（Phosphate buffered saline, PBS）稀釋之疫苗十毫升加入玻璃珠（glass beads；直徑○．○一至○．一一毫米）後，高速震盪五分鐘，再以6,000g離心十分鐘，取上清液○．一毫升接種於三個九至十一日齡雞胚胎尿囊腔內，另取二個為對照，於三十七攝氏度培養七日後，抽取尿囊液，並檢查胚胎須無任何病變或死亡；再將抽取之尿囊液接種於三個九日齡至十一日齡雞胚胎尿囊腔內，另取二個為對照，於三十七攝氏度培養七日後，檢查胚胎須無任何病變或死亡，尿囊液與等量五％雞紅血球混合，須無平板凝集反應。

四、活蟲卵數試驗：每劑量已芽孢化球蟲卵囊不得少於該疫苗標籤或仿單所記載之數量。

五、安全試驗：選一日齡至七日齡無特定病原（Specific pathogen free, SPF）雞七隻，隨機選二隻為對照，其餘五隻以口服接種疫苗十劑量。接種後連續觀察三週，所有雞隻應無不良反應而健存，剖檢腸道應無明顯之球蟲感染病變。